POLARIC™ 活細(xì)胞熒光變色溶劑

POLARIC™ 活細(xì)胞熒光變色溶劑

新型熒光染料

◆背景

　　POLARIC是活細(xì)胞獨(dú)特的變色熒光溶劑。POLARIC可根據(jù)細(xì)胞器微環(huán)境的疏水性變化，發(fā)射光譜改變顯著。

◆特點(diǎn)和優(yōu)點(diǎn)

●　細(xì)胞毒性極低。
●　在460-520 nm的激發(fā)波長(zhǎng)可達(dá)到最小細(xì)胞損傷。
●　抗褪色熒光。
●　根據(jù)細(xì)胞器的微環(huán)境的疏水性/親水性，發(fā)射光譜改變顯著。

◆實(shí)驗(yàn)流程

１．用3 μL乙醇溶解紅色染料沉淀，并將染料溶液轉(zhuǎn)移到10 mL培養(yǎng)基（染色溶液）中。 染色溶液可在4℃保存2周，避光保存。

２．將細(xì)胞培養(yǎng)在玻璃底皿（非液晶玻璃）上。
３．去除培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基，用PBS沖洗，加入等體積的預(yù)熱染色溶液。

４．細(xì)胞在5％CO₂，在37℃條件下孵育2小時(shí)10分鐘。 染色條件應(yīng)針對(duì)細(xì)胞進(jìn)行優(yōu)化。

５．染色后用培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞培養(yǎng)物3次。

６．使用熒光顯微鏡在Ex 460 nm 520 nm和Em 520 nm 700 nm下觀察染色的細(xì)胞。

◆應(yīng)用

1、使用案例<HEK293>

　　根據(jù)不同細(xì)胞器“著色變化"不同。

2、使用案例<Hela細(xì)胞>

3、使用案例<rVAC（大鼠內(nèi)臟脂肪細(xì)胞）>

　　線粒體：橙色
　　細(xì)胞膜：綠色
　　內(nèi)質(zhì)網(wǎng)：黃色

4、使用案例<大鼠心肌細(xì)胞>

　　可使用不同的顏色染色心肌細(xì)胞（橙色）和非心肌細(xì)胞。染色后，心肌細(xì)胞繼續(xù)跳動(dòng)。

染色結(jié)果比較

5、使用案例<大鼠骨髓單核細(xì)胞>

　　在大鼠骨髓單核細(xì)胞-破骨細(xì)胞分化培養(yǎng)過(guò)程中，染色觀察大鼠骨髓單核細(xì)胞向破骨細(xì)胞分化的過(guò)程。